河南农业科学 ›› 2013, Vol. 42 ›› Issue (12): 124-128.

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CYP3A39基因的克隆、表达及活性研究

薛正楷1,2,叶彬2,魏泓3   

  1. 1.泸州职业技术学院 生物医学工程研究所,四川 泸州 646005;2.重庆医科大学 分子医学与肿瘤中心,重庆 400016;3.第三军医大学 试验动物中心,重庆 400038
  • 收稿日期:2019-02-23 出版日期:2013-12-15 发布日期:2013-12-15
  • 作者简介:薛正楷(1968-),男,重庆永川人,副教授,博士,主要从事药物分子代谢与工程研究。E-mail:zk.xue988@163.com
  • 基金资助:
     国家“十五”科技攻关计划重点项目资助课题(2004BA717B23)

  • Received:2019-02-23 Published:2013-12-15 Online:2013-12-15

摘要: 为研究细胞色素氧化酶CYP3A39的生物学活性,采用RT-PCR方法从巴马小型猪肝组织中克隆CYP3A39基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建重组质粒,转染HepG2细胞,采用G418筛选,以获得稳定表达该基因的细胞株;以CYP3A特异性代谢底物睾酮为探针药物,在体外进行孵育,高效液相色谱仪测定睾酮羟基化产物6β-羟基睾酮(6β-OHT)的产量。结果显示,成功克隆了CYP3A39基因,建立了稳定表达CYP3A39基因的HepG2细胞株,且其具有睾酮代谢活性。 

关键词: 细胞色素氧化酶, CYP3A39, 基因克隆, 重组细胞, 代谢活性