河南农业科学 ›› 2014, Vol. 43 ›› Issue (9): 18-23.

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水稻OsLEA5c基因的克隆、表达和抗逆性分析

胡廷章,杨俊年,周大祥,黄小云,陈再刚   

  1. 重庆三峡学院 生命科学与工程学院,重庆404000
  • 收稿日期:2014-03-30 出版日期:2014-09-15 发布日期:2014-09-15
  • 作者简介:胡廷章(1965-),男,四川简阳人,教授,主要从事植物分子生物学研究。E-mail: tzhu2002@foxmail.com
  • 基金资助:
    重庆市自然科学基金项目(CSTC, 2012jjA80009);重庆市教委科学技术研究项目(KJ131101)

  • Received:2014-03-30 Published:2014-09-15 Online:2014-09-15

摘要: 为了研究水稻胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA5c的抗逆性,利用RT-PCR技术从水稻中克隆到OsLEA5c的cDNA。序列分析表明,OsLEA5c基因的读码框为456bp,编码1个由151个氨基酸残基组成的蛋白。蛋白分子量为16.55kD,等电点为5.07。OsLEA5c蛋白的平均亲水系数(GRAVY)为0.020,为疏水蛋白。OsLEA5c蛋白的44-140位氨基酸残基形成LEA2结构域。进化树分析表明,OsLEA5c属于第5组LEA蛋白的C亚组。OsLEA5c与5C亚组LEA蛋白的氨基酸一致性为45.14%61.59%。利用基因重组技术构建的原核表达载体pET32a-OsLEA5c,转化到E.coli BL21pLysS菌株中,诱导得到34kD的融合蛋白。OsLEA5c在大肠杆菌中的表达增加了大肠杆菌对高温、高盐、高渗透压和反复冻融的抗性。OsLEA5c基因在水稻抗逆和种子成熟脱水过程中发挥重要作用。 

关键词: 水稻, 胚胎发育后期丰富蛋白, OsLEA5c基因, 表达, 抗逆性