河南农业科学 ›› 2015, Vol. 44 ›› Issue (11): 5-10.

• 作物栽培 遗传育种 • 上一篇    下一篇

无选择标记转中国对虾抗菌肽基因水稻的获得及其遗传分析、抗病检测

董肇楠1,2,梅家松2,袁巧玲1,涂万富1,何正权1*,刘文真2*   

  1. 1.三峡大学 生物技术研究中心,湖北 宜昌 443002;2.中国水稻研究所 水稻生物学国家重点实验室, 浙江 杭州 310006
  • 收稿日期:2015-05-27 出版日期:2015-11-15 发布日期:2015-11-15
  • 通讯作者: 何正权(1972-),男,四川宜宾人,教授,博士,主要从事分子植物学研究。E-mail:zhq_he@ctgu.edu.cn 刘文真同为通讯作者。
  • 作者简介:董肇楠(1989-),男,安徽亳州人,在读硕士研究生,研究方向:水稻遗传育种。E-mail:962677831@qq.com
  • 基金资助:
     
    国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2013ZX08010-004)

  • Received:2015-05-27 Published:2015-11-15 Online:2015-11-15

摘要:  

为了获得不含筛选标记、抗病性显著增强的转抗菌肽基因水稻,利用双T-DNA载体系统将中国对虾抗菌肽基因dp3 和选择标记基因Hpt 导入到水稻恢复系明恢86中。结果表明,T1代110个株系中88.2%的株系出现抗感分离,其余11.8%的株系全为阴性。PCR检测7个分离比例符合3∶1的株系显示,dp3Hpt基因在3个株系中为自由组合, 在4个株系中出现连锁。在468个检测单株中筛选出31个无选择标记的转基因植株,占总样本的6.6%。RT-PCR检测T1代转基因植株显示,抗菌肽基因在RNA 水平上得到表达。用白叶枯病小种PXO86、PXO99和纹枯病小种GD-118、C-30对上述3个转基因株系进行接种,转基因阳性植株明显提高了对白叶枯病和纹枯病的抵抗力。

关键词: 中国对虾抗菌肽, T-DNA载体, 转基因水稻, 无选择标记, 白叶枯病, 纹枯病, 抗性