河南农业科学 ›› 2011, Vol. 40 ›› Issue (7): 109-112.

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农杆菌介导法将bFGF 基因转入木立芦荟的初步研究

刘思言1, 姚丹1, 关淑艳1, 王丕武2*   

  1. 1.吉林农业大学 生命科学学院, 吉林 长春 130118;2.吉林农业大学 农学院, 吉林 长春 130118
  • 收稿日期:2011-03-10 出版日期:2011-07-15 发布日期:2011-07-15
  • 通讯作者: 王丕武(1958-), 男, 吉林蛟河人, 教授, 博士生导师, 主要从事作物生物技术及作物遗传育种研究。 E-mail:peiwuw@yahoo.com.cn
  • 作者简介:刘思言(1979-), 女, 吉林四平人, 讲师, 硕士, 研究方向:作物生物技术。E-mail:siyan2001@163.com
  • 基金资助:
     转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08004-004);国家转基因专项(2008ZX08003-005)

  • Received:2011-03-10 Published:2011-07-15 Online:2011-07-15

摘要: 利用农杆菌介导法将bFGF基因导入木立芦荟中,通过对农杆菌介导芦荟遗传转化影响因素的分析,建立了优化的芦荟转化体系。用继代培养获得的粗壮的芦荟单株茎段作为转化外植体,以OD=0.55~0.68的EHA105农杆菌工程菌液侵染25 min,在MS+蔗糖10 g/L+100μmol/L乙酰丁香酮的共体培养基上培养3 d,在MS+6-BA 3 mg/L+头孢霉素400 mg/L+卡那霉素80 mg/L的筛选培养基上培养60 d,然后转至MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.15 mg/L的分化培养基进行培养,生根后移栽。通过PCR初步检测,并经Southern杂交进一步证明外源基因bFGF已经整合到芦荟的基因组中。 

关键词: 农杆菌介导, 木立芦荟, 遗传转化, 碱性成纤维细胞生长因子