河南农业科学 ›› 2015, Vol. 44 ›› Issue (5): 58-62.

• 作物栽培 遗传育种 • 上一篇    下一篇

烟草转录因子基因NtGRAS-R1的克隆与功能分析

 

李富欣1,2*,许芳芳1*,李素敏1*,肖万福1,孙艳敏3,刘卫群1,郭红祥1**
  

  1.  
    1.河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 450002; 2.河南省烟草公司,河南 郑州 450002;3.濮阳市农业科学院,河南 濮阳 457000
  • 收稿日期:2014-11-25 出版日期:2015-05-15 发布日期:2015-05-15
  • 通讯作者: 郭红祥(1974-),男,河南获嘉人,副教授,博士,主要从事烟草生理生化研究。E-mail:guohongxiang06@126.com
  • 作者简介:李富欣(1970-),男,河南宜阳人,高级农艺师,博士,主要从事烟叶生产工作。E-mail:yy4431@163.com。 *为同等贡献者。
  • 基金资助:
     
    河南省烟草公司重点项目(HYKJ201308)

  • Received:2014-11-25 Published:2015-05-15 Online:2015-05-15

摘要: 为了分析Nt GRAS-R1的生物学功能,在NCBI上BLAST植物的EST数据库拼接获得NtGRAS-R1的全长序列;根据该序列设计特异引物,利用PCR方法从烟草根系c DNA中扩增NtGRAS-R1,将其连接到p S1300表达载体上,采用农杆菌介导的花序侵染法转化拟南芥,采用RTPCR法检测转基因拟南芥植株;获得稳定转基因拟南芥后观察生长性状,并用q PCR方法检测AtCLV3基因的表达情况。结果显示,Nt GRAS-R1基因属于HAM亚家族,编码508个氨基酸;观察发现,转基因拟南芥植株根长和根体积明显大于野生型;q PCR结果表明,转基因拟南芥At CLV3的表达量明显低于野生型拟南芥。初步表明Nt GRAS-R1参与根系生长发育调控过程。 

关键词: 烟草, 根系, NtGRAS-R1, 打顶, 发育调控