口蹄疫3D蛋白N端T细胞表位重组蛋白的表达、纯化及鉴定

河南农业科学 ›› 2012, Vol. 41 ›› Issue (9): 133-137.

口蹄疫3D蛋白N端T细胞表位重组蛋白的表达、纯化及鉴定

卢清侠¹，王世红¹，金前跃¹，李清州²，郝慧芳¹，张改平¹*

1.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室，河南郑州 450002；2.河南省农业科学院农业经济与信息研究中心，河南郑州 450002

收稿日期:2012-05-16 出版日期:2012-09-15 发布日期:2012-09-15
通讯作者: 张改平（1960-），男，河南内黄人，中国工程院院士，博士生导师，主要从事动物免疫学与动物疫病快速诊断研究。E-mail：zhanggaiping2003@yahoo.com.cn
作者简介:卢清侠（1982-），女，山西侯马人，助理研究员，博士，主要从事动物病毒学与免疫学研究。E-mail：luqigxia82@163.com
基金资助:
河南省级重点实验室建设专项(122300413217);河南省博士后项目一等资助

Received:2012-05-16 Published:2012-09-15 Online:2012-09-15

摘要/Abstract

摘要： 为获得具有抗原性的口蹄疫病毒(FMDV)3D蛋白N端T细胞表位的重组表达蛋白,根据FMDV3D蛋白前115位氨基酸序列,设计优化并人工合成相应的核酸序列,将其克隆至pET-28a中,构建原核表达质粒pET28a-115,并将重组质粒转化至BL21(DE3)细胞。经IPTG诱导后,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-bolt鉴定,结果显示,在16kD处有一条明显的蛋白表达条带。对表达产物进行可溶性分析,结果表达蛋白50%为可溶性蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化后获得了较高浓度和纯度的目的蛋白。研究结果表明,含FMDV 3D蛋白前115位氨基酸的重组蛋白在大肠杆菌中得到了高效可溶性表达,并具有较好的抗原活性,为开发口蹄疫诊断试剂和基因工程疫苗奠定了基础。

关键词: 口蹄疫, 3D聚合酶, T细胞表位重组蛋白, 原核表达, 疫苗佐剂

卢清侠，王世红，金前跃，李清州，郝慧芳，张改平. 口蹄疫3D蛋白N端T细胞表位重组蛋白的表达、纯化及鉴定[J]. 河南农业科学, 2012, 41(9): 133-137.

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