河南农业科学 ›› 2012, Vol. 41 ›› Issue (7): 138-141.

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盐酸金霉素人工抗原的合成及鼠源多抗血清的制备

李 靓1,2,职爱民1,李青梅1,刘庆堂1,侯玉泽2,胡骁飞1,邓瑞广1,张改平1*   

  1. 1.河南省农业科学院 农业部动物免疫学重点开放实验室,河南 郑州450002;2.河南科技大学 食品与生物工程学院,河南 洛阳 471003
  • 收稿日期:2012-03-16 出版日期:2012-07-15 发布日期:2012-07-15
  • 通讯作者: 张改平(1960-),男,河南内黄人,研究员,博士生导师,中国工程院院士,主要从事动物免疫学和兽药残留研究。E-mail:zhanggaiping2003@yahoo.com.cn
  • 作者简介:李 靓(1986-),女,河南郑州人,在读硕士研究生,研究方向:食品安全检测。E-mail:jing19861981@163.com
  • 基金资助:
    “十二五”国家科技支撑计划项目(2011BAE00249)

  • Received:2012-03-16 Published:2012-07-15 Online:2012-07-15

摘要: 采用碳二亚胺法将金霉素(chlortetracyline,CTC)偶联到载体蛋白BSA(牛血清白蛋白)和OVA(鸡卵清蛋白)上,形成免疫原BSA-CTC与包被原OVA-CTC。通过紫外分光光度法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行抗原鉴定,用间接ELISA测定多抗血清(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性。结果表明,在UV下出现了明显特征峰,BSA-CTC的峰与BSA、CTC相比均发生改变,表明半抗原与载体成功偶联。共免疫了5只小鼠,pAb效价均达到1×10-3,其中3号小鼠多抗血清抑制效价最低,IC50(半数抑制质量浓度)为71.47ng/mL。由此得出,获得了高效价、强特异的盐酸金霉素多抗血清,为盐酸金霉素单抗的制备奠定了基础。 

关键词:  , 盐酸金霉素, 多抗血清, 人工抗原