河南农业科学 ›› 2012, Vol. 41 ›› Issue (6): 144-147.

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

王志红1,2, 张改平2,郭军庆2,李青梅2,王寅彪2,陈 稳2,王爱萍1   

  1. 1.郑州大学 生物工程系,河南 郑州 450001;2.河南省农业科学院 农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002
  • 收稿日期:2012-02-11 出版日期:2012-06-15 发布日期:2012-06-15
  • 通讯作者: 王爱萍(1970-),女,青海西宁人,教授,主要从事动物免疫学研究。E-mail:pingaw@126.com
  • 作者简介:王志红(1983-),女,河南濮阳人,在读硕士研究生,研究方向:动物分子免疫学。E-mail:wangzhihong.0718@163.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金面上项目(31072122)

  • Received:2012-02-11 Published:2012-06-15 Online:2012-06-15

摘要: 为了制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV)的单克隆抗体,利用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV)GP5重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和NS0浆细胞瘤细胞进行融合,经间接ELISA和阻断ELISA筛选、有限稀释法克隆化获得3株能稳定分泌抗PRRSV GP5蛋白单克隆抗体的(mAb)杂交瘤细胞株,命名为4B7、2C5和2E4。间接免疫荧光(IFA)和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)结果显示,3株mAb均与感染PRRSV BJ 4株的Marc 145细胞特异性反应,表明其可识别天然病毒蛋白。mAb的Ig亚类均为IgG1,细胞培养上清和腹水的ELISA效价分别为1∶256和1∶51 200,Western blot分析表明,mAb均特异性识别PRRSV GP5蛋白。 

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒, GP5蛋白, 单克隆抗体