河南农业科学 ›› 2012, Vol. 41 ›› Issue (6): 128-132.

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留兰香茎尖超低温保存及遗传变异分析

郭强梨,李忠爱,邵 丽,王子成*   

  1. 河南大学 生命科学学院,河南 开封 475004
  • 收稿日期:2011-12-21 出版日期:2012-06-15 发布日期:2012-06-15
  • 通讯作者: 王子成(1974-) ,男,河南邓州人,副教授,博士,主要从事植物生物技术与表观遗传研究。E-mail:wzc@henu.edu.cn
  • 作者简介:郭强梨 (1987-),女,河南滑县人,在读硕士研究生,研究方向:基因工程与细胞工程。E-mail:578580087@qq.com
  • 基金资助:
     国家自然科学基金项目(30900973)

  • Received:2011-12-21 Published:2012-06-15 Online:2012-06-15

摘要:  为了长久保存留兰香种质资源,以留兰香(Menthae spicatae L.)茎尖为材料,对其玻璃化超低温保存条件进行研究,并运用扩增片段长度多态性(AFLP)和甲基敏感扩增多态性(MSAP)对玻璃化超低温保存再生材料(处理组)的遗传与表观遗传稳定性进行分析。结果表明:留兰香试管苗于4℃低温锻炼28d,于添加2mol/L甘油的MS培养基中预培养4d,0℃下于PVS2中脱水50min,液氮保存1h或者更长时间,成活率最高,可达60%左右,再生植株分化正常;超低温处理后再生材料(处理组)与正常继代材料(对照组)之间未发现有DNA片段的差异;与对照相比,处理组的材料均发生了甲基化状态与水平的变化,全基因组DNA胞嘧啶甲基化水平降低,另外,甲基化与去甲基化位点比率分别为8.93%和12.3%,说明超低温处理能够引起DNA甲基化的变化。由此推测,DNA甲基化可能是植物适应超低温保存的机制之一。 

关键词: 留兰香, 超低温保存, AFLP, MSAP, DNA甲基化